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PCR-Kammern ausgestattet um die parallele Analyse mehrerer Proben zu ermöglichen Das neue Gerät sollte thermische Zyklen gleichzeitig in drei Probenkammern durchführen Gleichzeitig mussten die PCR-Kammern für die Echtzeitüberwachung durch Mehrkanal-Fluoreszenzdetektion zugänglich bleiben Bei dieser Variante der klassischen PCR – auch Real-Time-PCR oder quantitative PCR qPCR genannt – werden dem Verfahren Fluoreszenzfarbstoffe hinzugefügt die sich in den vervielfältigten Proben einlagern Die Genamplifikation lässt sich so farblich nachverfolgen Je höher die Fluoreszenz desto größer die Anzahl der kopierten DNA Temperaturstabilität in jeder Phase Schließlich ging es an die präzise Temperaturkontrolle – das Aund Oeines guten Thermo cyclers Das Gerät muss schnell zuverlässig und präzise zwischen den jeweiligen Temperaturen des dreistufigen Zyklus wechseln können Hohe Temperaturuniformität ist für die Zuverlässigkeit des Verfahrens entscheidend um reproduzierbare Ergebnisse zu liefern Schwankungen dürfen nur innerhalb weniger zehntel bis hundertstel Grad Celsius liegen Der hier entwickelte Thermocycler erfüllt nun diese Anforderung wodurch die thermische Gleichmäßigkeit von Probe zu Probe zwischen den Kartuschen-Kammern sichergestellt ist Die Grafik zeigt die Temperaturkontrolle dreier PCR-Kammern die ausgehend von einer Umgebungstemperatur von ca 23 °Czwischen 50 °Cund 95 °Czyklisiert wurden Für den Temperaturwechsel von 45 °Cbraucht der Thermocycler durchschnittlich ca 4 s Bei einer Temperatur von 95 °Cliegt die Temperaturgenauigkeit bei 0 13 ± 0 009 °C Die Ingenieure von Plexus unterzogen das komplette System einer Analyse einschließlich der Kartuschen und identifizierten kritische Aspekte Die daraus resultierenden Designoptionen wurden in anschließenden Tests einer genauen Prüfung unterzogen um die optimale Lösung zu finden Auch Faktoren die sich auf den Produktlebenszyklus der Lösung auswirken wie etwa Materialkosten Entwicklungszeit Herstellbarkeit Wartungsfreundlichkeit und Lebensdauer der Komponenten wurden berücksichtigt Das auftraggebende Unternehmen konnte sein Pointof-Care-MDx-System erfolgreich in den Markt einführen AUTOR Robert Frodl Director DACH Customer Development for Engineering Solutions Plexus Darmstadt plexus deutschland@plexus com www plexus com de Life Sciences | Labordiagnostik 32 www labo de 10 2022 Temperaturkontrolle über alle drei PCR-Kammern Bild Plexus